MEDISCH: De expressie van cytosolische eiwitten in het synovium van patiënten met artrose na laseren


Nederlandse vertaling staat onder het onderzoek weergegeven.


NEDERLANDSE VERTALING

Achtergrond en doel: Lasertherapie op laag niveau (LLLT) is ontwikkeld voor niet-invasieve behandeling van gewrichtsaandoeningen. We hebben eerder aangetoond dat LLLT de synoviale eiwitexpressie beïnvloedde bij reumatoïde artritis. Het doel van deze studie was om de effecten van laserbestraling op osteoartritische (OA) synoviale eiwitexpressie te beoordelen.

Onderzoeksopzet / Materialen en werkwijzen: De synoviale membraan monsters uit de knieën van 6 OA patiënten bestraald ex vivo toepassing van een nabij-infrarood diodelaser (25 J / cm 2 ). Een onbehandeld monster van dezelfde patiënt diende als controle. Synoviale eiwitscheiding en identificatie werden uitgevoerd door respectievelijk tweedimensionale differentiële gelelektroforese en massaspectrometrie.

Resultaten: Elf eiwitten die veranderde expressie vertoonden als gevolg van laserbestraling, werden geïdentificeerd. Er waren drie patiënten van wie de weefselmonsters een significante toename (p <0,05) vertoonden in mitochondriale warmteschok 60 kD proteïne 1-variant 1. De expressie van de andere proteïnen (calpaïne kleine subeenheid 1, tubuline alfa-1C en bèta 2, vimentinevariant 3, annexine A1, annexine A5, cofiline 1, transgeline en collageen type VI alpha 2 keten precursor) significant afgenomen (p <0,05) in vergelijking met de controlemonsters.

Conclusies: Een enkele diodelaserbestraling van de synoviale monsters van patiënten met artrose kan de expressie van sommige eiwitten in vitro statistisch significant veranderen . Deze bevindingen leveren wat meer bewijs voor de biologische werkzaamheid van zachte laserbehandeling, gebruikt voor artrose.

Sleutelwoorden: ex vivo, lasertherapie, proteomics, synoviaal membraan

Invoering

Studies naar de expressie van eiwitten (proteomics) spelen een steeds belangrijkere rol in het onderzoek van verschillende klinische entiteiten (1). Deze techniek is met succes gebruikt bij het bestuderen van de expressie van cytosolische eiwitten van de synoviale membranen bij reumatoïde artritis (RA), osteoartritis (OA) en spondylitis ankylopoetica (AS). Er werden verschillen gevonden in de eiwitexpressie van calgranuline A, vimentine, α-enolase, fructosebifosfaataldolase A in het synoviale membraan van patiënten met RA en AS in vergelijking met OA (2). De identificatie van nieuwe biologische en klinische markers van inflammatoire reumatische aandoeningen (RA, AS) opende nieuwe mogelijkheden voor het verder ontleden van de synoviale effecten van lasertherapie op laag niveau (LLLT) (3). Bjordal et al. (4) bewezen de ontstekingsremmende en pijnstillende effecten van LLLT in het infrarode golflengtebereik bij achillespeesontsteking in een gerandomiseerde, placebogecontroleerde studie. Verschillende auteurs hebben de gunstige klinische resultaten van LLLT bij artrose en tendinopathie gerapporteerd (5). Peesin vitro- onderzoeken LLLT verminderde de ontsteking door de productie van PGE2 te verminderen en door cyclo-oxygenase 2 te remmen (6 - 13). Rizzi et al. (14) toonde aan dat LLLT de ontstekingsreactie veroorzaakt door trauma bij dieren verminderde door de effecten van reactieve zuurstofsoorten (ROS) en de activering van nucleaire factor kappa B (NFκB) Bo et al. Te blokkeren. (15) suggereerde ook het belang van proteomics voor het begrijpen van ziektepathogenese bij artritis en voor het identificeren van nieuwe therapeutische doelen. Ten slotte hebben we onlangs aangetoond dat de expressie van sommige eiwitten in het reumatoïde synoviale membraan significant veranderde na laserbestraling (16).

In de huidige studie wilden we bepalen of het expressiepatroon van synoviale eiwitten in OA zou worden beïnvloed door ex vivo laserbestraling.

patienten en methodes

Patiënten

Er werden synoviale monsters van zes patiënten met knieartrose bestudeerd volgens de classificatiecriteria van het American College of Rheumatology (ACR). De klinische en laboratoriumkenmerken van onze patiënten worden weergegeven in tabel 1.

Monstervoorbereiding en eiwitextractie

Na de operatie werden OA-synoviale membraanmonsters onmiddellijk in Medium 199 (Sigma Aldrich) -oplossing bij 4 ºC geplaatst. Eerst het vet en bindweefsel werden vervolgens verwijderd twee 0,5 cm 2 stukken uit de macroscopisch identieke aangrenzende delen van de synoviale membranen werden uitgesneden. De helft van de monsters werden bestraald met een laser (25 J / cm 2) in petrischalen die M199-medium bevatten. De controlemonsters werden onder identieke omstandigheden bewaard, maar werden niet bestraald. Laserbestraling werd uitgevoerd met behulp van een KLS-500-type diodelaser (Laseuropa Ltd, Boedapest, Hongarije), een laserinstrument dat vergelijkbaar is met degene die in onze klinische praktijk worden gebruikt. De parameters van de laser waren als volgt: golflengte: 809 nm; vermogen: 448 mW; output diafragma grootte: 2 x 4,5 nm; straaldivergentie: 5º. Na bestraling werden de monsters 21 uur bij 37 ° C geïncubeerd in M199-medium in 5% CO 2thermostaat (Heto-Holten). De monsters werden tot verder gebruik bij -70 ° C bewaard. Om eiwitten te extraheren, werden de bevroren monsters gehomogeniseerd met behulp van een homogenisator (Janke & Kunkel Ika-Werk Ultra Turrax) op ijs in 300-300 μl lysisbuffer (7 M ureum, 2 M thioureum, 30 mM Tris, 4% CHAPS, pH 8,5 ). De oplossing onderging 1 minuut ultrasone behandeling (Bandelin Sonorex TK52) en werd vervolgens gecentrifugeerd (12.000 g, één uur, 4 ºC). De eiwitten in de bovenstaande vloeistof werden geprecipiteerd met aceton (1: 4 v / v), daarna werden ze gecentrifugeerd (3.000 g, 10 minuten, 4 ºC). De eiwitmonsters werden bewaard in een lysisbuffer bij -20 ºC tot analytische verwerking.

Scheiding van eiwitten door tweedimensionale differentiële gelelektroforese (2D-DIGE)

De pH van de eiwitmonsters werd ingesteld op 8,0 en vervolgens werd de eiwitconcentratie van de monsters bepaald met behulp van de PlusOne Quant Kit (GE Healthcare) volgens het protocol van de fabrikant. Van elk monster werd 5 μg eiwitten gelabeld met CyDye DIGE Fluor Labeling-kit voor kleurstof voor schaarse monsters (GE Healthcare) (4 nmol kleurstof / 5 μg eiwitten) volgens het protocol. Monsters met 2,5 μg eiwitten van elke controle en elk met een laser behandeld monster kwamen in het gepoolde (interne standaard) monster. Dit samengevoegde monster werd gelabeld met Cy3, terwijl de controle en de behandelde monsters werden gelabeld met Cy5. Vervolgens werden de twee verschillend gelabelde monsters (5 μg monsters en 5 μg gepoolde monsters gelabeld met Cy5 en Cy3, respectievelijk) gemengd. Vervolgens werden 2 mg / ml dithio-threitol (DTT) en 5 μl / ml IPG-buffer vers aan onze buffer toegevoegd (8 M ureum, 4 v / v% CHAPS, 15 v / v% glycerine), werden de gemengde monsters voltooid tot 450 μl. De monsters werden vervolgens gedurende 14 uur bij kamertemperatuur gerehydrateerd op IPG-strips van 24 cm (pH 3-10 NL, GE Healthcare). Rehydratatie werd gevolgd door de iso-elektrische focussering van de eiwitten gedurende 23,5 uur met behulp van Multiphore II (GE Healthcare) apparatuur. De instellingen waren dezelfde als eerder gerapporteerd (16). Hierna werden de gefocuste eiwitten gereduceerd met / in een geëquilibreerde oplossing gedurende 20 minuten (1,5 M Tris, 6 M ureum, 30% glycerine, 20% natriumdodecylsulfaat (SDS), 0,1% bromide-fenolblauw, 1 μl / ml mercaptoethanol), vervolgens werden de stroken op SDS-polyacrylamidegels van 10% geplaatst en voorzien van een agaroplossing van 0,5%. De gels werden gelopen in lopende kuipen gevuld met lopende buffers (Ettan Dalt Six, GE Healthcare) met de volgende parameters: 60 minuten, 18 ºC, 2 W / gel; daarna: 6 uur, 18 ºC, 12 W / gel. Aan het einde van het gebruik werden de gels gescand door het Typhoon TRIO + -apparaat op een golflengte die overeenkomt met de toegepaste CyDye-kleurstoffen. De gescande afbeeldingen werden geëvalueerd met de programma's DIA (DeCyder Differential Image Analysis) en BVA (DeCyder Biological Variation Analysis). De eiwitvlekken werden geïdentificeerd waarin de hoeveelheid eiwitten significant verschilde (p <0,05) in het behandelde monster in vergelijking met de controle. De gescande afbeeldingen werden geëvalueerd met de programma's DIA (DeCyder Differential Image Analysis) en BVA (DeCyder Biological Variation Analysis). De eiwitvlekken werden geïdentificeerd waarin de hoeveelheid eiwitten significant verschilde (p <0,05) in het behandelde monster in vergelijking met de controle. De gescande afbeeldingen werden geëvalueerd met de programma's DIA (DeCyder Differential Image Analysis) en BVA (DeCyder Biological Variation Analysis). De eiwitvlekken werden geïdentificeerd waarin de hoeveelheid eiwitten significant verschilde (p <0,05) in het behandelde monster vergeleken met de controle.

Eiwitidentificatie met behulp van preparatieve gel en data-analyse

Eiwitmonsters van 800 μg werden aan de preparatieve gel toegevoegd. Tijdens de eerste dimensionale run werd het protocol dat overeenkomt met de analytische gel aangebracht. Afwijking trad net op bij de tweedimensionale run. De glasplaten die werden gebruikt voor de bereiding van de gel waren behandeld met een blinde silaanoplossing (ethanol: 80%, ijsazijnzuur: 0,02%, blind silaan: 0,001%, ddw: 18%). Na de run werden de gels een uur gefixeerd (20% methanol, 1% fosforzuur), daarna werden ze geverfd met methanol: A: B = 2: 8: 1 oplossing. (Oplossing A: 0,3 M ammoniumsulfaat, 2,4% fosforzuur; oplossing B: 5% Coomassie Blue G-250) gedurende één week. Vervolgens werden de gels geneutraliseerd met een Tris-oplossing van 0,05 M (pH 6,5) gedurende 3 minuten, daarna werd het gewassen met methanol van 25%, en tenslotte werd het gedurende 8 uur gestabiliseerd met ammoniumsulfaat van 0,75 M. Op basis van de resultaten van de analytische gel werden de identieke eiwitvlekken van de preparatieve gel uitgesneden. Deze werden geëvalueerd in het Departement Chemie aan de Universiteit van Szeged door middel van vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LC-MS / MS) analyse. Voor de identificatie van eiwitten werden de volgende criteria gebruikt: eiwitscore> 66 (zie tabel 2) en significantieniveau van p <0,05 werden als significant beschouwd.

Resultaten

In totaal oefenden 11 eiwitten differentiële expressie uit in LLLT-behandelde OA-synoviale weefselmonsters in vergelijking met onbehandelde controlemonsters (tabel 2).

Mitochondriale hitteschok 60 kD proteïne 1 variant 1 (mhsp60) was het enige proteïne dat significant verhoogde expressie vertoonde in synoviaal weefsel van drie patiënten na LLLT vergeleken met onbehandeld synoviaal weefsel (p <0,05).

Andere synoviale eiwitten, zoals calpaïne kleine subeenheid 1, tubuline alfa-1C en bèta 2, vimentin variant 3, annexine A1, annexine A5, cofiline 1, transgeline en collageen type VI alfa 2 keten precursor oefenden significant lagere expressie uit in OA synovium van ongeveer ten minste drie patiënten die LLLT volgen in vergelijking met controles (p <0,05) (tabel 3).

Discussie

De klinische werkzaamheid van LLLT bij verschillende artritiden, waaronder OA, is vastgesteld. Er is echter weinig bekend over de exacte moleculaire effecten van laserbestraling. Sommige onderzoeksgroepen hebben gelelektroforese en MS proteomische technieken gebruikt om de samenstelling van gezond en artrose kraakbeen te vergelijken. Garcia et al. (17) bestudeerden de componenten van OA-chondrocyten en extracellulaire matrix (ECM) door middel van MS-methode. Verschillende eiwitten die betrokken zijn bij ECM-organisatie, signaaltransductie, celcommunicatie, immuunresponsen en metabolisme vertoonden differentiële expressie. Kirsch et al. (18) toonde de expressie van alkalische fosfatase, annexine II en type VI type collageen in de chondrocyten van de bovenste zone van menselijk OA-kraakbeen, maar geen van deze in gezond menselijk kraakbeen.

Hier presenteren we alleen die eiwitten die significant verhoogde of verlaagde expressie op LLLT uitoefenden.

Onze resultaten tonen een verhoogde expressie van mhsp60 in artrose synoviaal membraan na LLLT in vergelijking met onbehandelde controles. Dit eiwit behoort tot de hsp60 (chaperonine) familie (19-21). Tsan et al. (22) beschouw hsp-s als moleculaire chaperonnes die polypeptideketens herkennen en binden, en de gedeeltelijk gevouwen tussenproducten van eiwitten. Hsp remt aggregatie, foutieve vouwing en bemiddelt direct eiwitvouwing als chaperonnes. Yokota et al. (23) toonden aan dat de anti-hsp60-antilichaamspiegels hoger zijn bij auto-immuunziekten zoals reumatoïde artritis, SLE, het syndroom van Sjögren en gemengde bindweefselziekte in vergelijking met gezonde controles. Sedlackova et al. (24) suggereerde dat het expressieprofiel van het hsp60-gen zou kunnen dienen als een nieuwe marker in de differentiële diagnose tussen RA en OA.

Enkele andere eiwitten die een verminderde synoviale expressie vertonen na LLLT, waaronder calpaïne kleine subeenheid 1. Dit is een calciumafhankelijk cysteïneprotease dat wordt gevormd in het kraakbeen en het synoviaal weefsel. RA- en OA-chondrocyten scheiden actief calpaïne uit en het calpaïnegehalte is verhoogd in zowel RA- als OA-synoviale vloeistoffen in vergelijking met normale controles (25, 26). Whiteman et al. (27), evenals Squier et al. (28) beschreven peroxynitriet (ONOO -) -gemedieerde, calciumafhankelijke mitochondriale disfunctie en apoptose veroorzaakt door activering van calpaïne. Szomor et al. (29) ontdekten dat calpaïne-expressie in muriene collageen-geïnduceerde artritis (CIA) correleerde met de ernst van ontsteking en vernietiging van kraakbeen. In een vroege fase van CIA fungeert calpaïne als een matrixproteïnase en speelt het een rol bij enzymactivering en kraakbeenvernietiging. Hoewel calpaïne wordt beschouwd als een intra-articulair enzym, is onlangs calpaïne ook gedetecteerd op de plaats van callusvorming na de breuk van groeiend kraakbeen (30), evenals in gewrichtsvloeistoffen van artrosepatiënten (31). Solau-Gervais et al. (32) vergeleken de activiteiten van cysteïneproteasen en dipeptidylpeptidase in synoviale weefsels van RA-, OA- en posttraumatische artritispatiënten. De activiteit van calpaïne was hoger bij reuma en artrose in vergelijking met posttraumatische controles. Struglics et al. (33) suggereren dat calpaïne een rol speelt bij de splitsing van menselijk aggrecan. Door Calpain gegenereerde fragmenten werden gedetecteerd in zowel normaal als OA-kraakbeen en gewrichtsvloeistoffen. Iguchi-Hashimoto et al. (34) beschreven de overexpressie van calpastatine, een calpaïne-antagonist bij artritis. Calpastatine onderdrukt de productie van IL-6, evenals NFκB-signalering bij RA. Aangezien calpaïne in hoge mate betrokken is bij de vernietiging van kraakbeen en de expressie ervan wordt verminderd door laserbestraling, kan LLLT de door calpaïne gemedieerde afbraak bij artrose verminderen. Calpastatine onderdrukt de productie van IL-6, evenals NFκB-signalering bij RA. Aangezien calpaïne in hoge mate betrokken is bij de vernietiging van kraakbeen en de expressie ervan wordt verminderd door laserbestraling, kan LLLT de door calpaïne gemedieerde afbraak bij artrose verminderen. Calpastatine onderdrukt de productie van IL-6, evenals NFκB-signalering bij RA. Aangezien calpaïne in hoge mate betrokken is bij de vernietiging van kraakbeen en de expressie ervan wordt verminderd door laserbestraling, kan LLLT de door calpaïne veroorzaakte afbraak bij artrose verminderen.

Actine en tubuline zijn eiwitten van het cytoskelet. Tubuline behoort tot de familie van bolvormige eiwitten en is een bestanddeel van microtubuli. De expressie van α-tubuline was significant verminderd in alle synoviale weefselmonsters na LLLT. Ramos-Ruiz et al. (35) vonden onderdrukte tubuline-synthese in de synoviocyten van ratten met adjuvante artritis. De remming van de tubuline-synthese kan een eerste stap zijn in de ontwikkeling van adjuvante artritis.

De expressie van cofiline werd ook verminderd door LLLT in twee synoviale monsters in onze studie. Campbell et al. (36) ontdekten dat cofiline-expressie significant werd opgereguleerd in chondrocyten na mechanische belasting. Rollin et al. (37) voerde differentieel proteomisch onderzoek uit van chondrocyten bij artrosepatiënten. De expressie van cytoskeletbindende eiwitten, waaronder cofiline en annexine 2, nam significant toe in OA-chondrocyten. Blain et al. (38) beschreef een driedimensionaal netwerk van cytoskeletaal tubuline en intermediaire filamenten. Tubuline en cofiline zijn betrokken bij de vorming van cytoskelet en ook bij hermodellering en mechanische eigenschappen van het kraakbeen.

De expressie van Vimentin-variant 3 was significant verminderd na LLLT in de synoviale monsters van drie artrosepatiënten. Haudenschild et al. (39) meldden dat de veranderingen in de organisatie van vimentine correleren met de progressie van artrose, maar de resultaten van deze veranderingen, vooral bij chondrocyten, zijn niet duidelijk. In hun differentiële proteomische analyse van normale en OA-chondrocyten, Lambrecht et al. (40) ontdekten dat het vimentinenetwerk ernstig verstoord is bij artrose. De organisatie van gespleten vimentine werd beschreven in OA-chondrocyten. Tilleman et al. (41) bestudeerde de splitsing van gecitrullineerde vimentine-isovormen in artrose-kraakbeen. Net als bij Haudenschild et al. (39), ontdekte deze groep dat de verstoring van het vimentinenetwerk de mechanische integriteit van cellen verzwakte. Wang et al. (42) merkten op dat in talrijke celtypen

Ea et al. (43) besprak de rol van bijlage A5 in OA. Bifasische kristallen van calciumfosfaat (BCP) en hydroxyapatiet (HA) worden in verband gebracht met ernstige vormen van artrose. Bij ernstige artrose is apoptose van chondrocyten geassocieerd met de overexpressie van annexine V en BCP-kristalafzetting in de matrix. Er werd aangetoond dat de overexpressie van annexine V kan bijdragen aan de hypocellulariteit van het gewrichtskraakbeen. De vermindering van de expressie van annexine V door LLLT-behandeling kan leiden tot verminderde apoptose van chondrocyten bij artrose.

We zagen een significante afname in de expressie van collageen type VI alfa 2-ketenvoorloper in vijf OA synoviale monsters na laserbehandeling. Hambach et al. (44) toonden ernstige afwijkingen aan in de expressie en distributie van pericellulair collageen VI in artrose. Bij het vergelijken van gezond en artrose-kraakbeen kwamen de drie ketens van collageen VI overvloedig tot expressie in gezond gewrichtskraakbeen, terwijl de expressie van collageen VI significant was verminderd in de oppervlakkige laag van kraakbeen bij artrose. De auteurs concludeerden dat de onderexpressie van collageen VI in het kraakbeen eerder het gevolg kan zijn van verhoogde afbraak dan van een verminderde synthetische activiteit. Murray et al. (45) suggereerde dat bij artrose de verstoring van pericellulair collageen VI geassocieerd was met een verhoogde productie van IL-1β. Dus,

Concluderend suggereert de significante toename in de expressie van mhsp60 na LLLT-behandeling van artrose-synoviale monsters het bestaan ​​van een herstelproces dat eiwitaggregaties en verkeerde vouwing van eiwitten remt. De verminderde expressie van calpaïne kleine subeenheid 1, annexine A5, vimentin variant 3 en collageen type VI alfa 2 keten precursor expressie na LLLT kan resulteren in de onderdrukking van kraakbeenafbraak bij artrose. Onze studie leverde aanvullend bewijs voor de moleculaire effecten van LLLT bij reumatische aandoeningen.

Referenties

1 Anderson, NL, Anderson, NG. Het proteoom van menselijk plasma. Mol Cell Proteomics 2002; 1: 845-267.

2 Sinz A, Bantscheff M, Mikkat S, Ringel B, Drynda S, Kekow J, et al. Massaspectrometrische proteoomanalyses van synoviale vloeistoffen en plasma van patiënten die lijden aan reumatoïde artritis en vergelijking met reactieve artritis of osteoartritis. Elektroforese 2002; 23: 3445-3456.

3 Smolen JS, Aletaha D, Grisar J, Redlich K, Steiner G, Wagner O. De behoefte aan prognosticatoren bij reumatoïde artritis Biologische en klinische markers waar staan ​​we nu? Arthritis Res Ther 2008; 10: 208.

4 Bjordal JM, Lopes-Martins RA, Iversen VV. Een gerandomiseerde, placebo-gecontroleerde studie van lasertherapie op laag niveau voor geactiveerde achillespeesontsteking met microdialyse-meting van peritendineuze prostaglandine E2-concentraties. Br J Sports Med 2006; 40: 76-80.

5 Bjordal J, Couppé C, Ljunggreen A. Lasertherapie op laag niveau voor tendinopathie Bewijs van een dosis-responspatroon. Phys Ther Rev 2001; 6: 91-99.

6 Bjordal J, Couppé C, Chow RT, Tunér J, Ljunggren EA. Een systematische review van lasertherapie op laag niveau met locatiespecifieke doses voor pijn door chronische gewrichtsaandoeningen. Aust J Physiother 2003; 49: 107-116.

7 Loevschall H, Arenholt-Bindslev D. Effect van lage diodelaserbestraling van menselijke mondslijmvliesfibroblasten in vitro. Lasers Surg Med 1994; 14: 347-354.

8 Pereira AN, Eduardo CP, Matson E, Marques MM. Effect van laserbestraling met laag vermogen op celgroei en procollageensynthese van gekweekte fibroblasten. Lasers Surg Med 2002; 31: 263-267.

9 Almeida-Lopes L, Rigau J, Zângaro RA, Guidugli-Neto J, Jaeger MM. Vergelijking van de low-level lasertherapie-effecten op de proliferatie van gekweekte menselijke gingivale fibroblasten met verschillende bestralingen en dezelfde fluentie. Lasers Surg Med 2001; 29: 179-84.

10 Reddy GK, Stehno BL, Enwemeka CS. Laserfotostimulatie van de productie van collageen bij het genezen van de achillespees van konijnen. Lasers Surg Med 1998; 22: 281-287.

11 Yu W, Naim JO, Lanzafame RJ. Effecten van fotostimulatie op wondgenezing bij diabetische muizen. Lasers Surg Med 1997; 20: 56-63.

12 Honmura A, Ishii A, Yanase M, Obata J, Haruki E. Het analgetische effect van GaAlAs-diodelaserbestraling is hyperalgesie bij door carrageen geïnduceerde ontsteking. Lasers Surg Med 1993; 13: 463-469.

13 Sakurai Y, Yamaguchi M, Abiko Y. Het remmende effect van laserbestraling op laag niveau op LPS stimuleerde de productie van prostaglandine E2 en cyclo-oxygenase2 in menselijke tandvleesfibroblasten. Eur J Oral Sci 2000; 10: 829-34.

14 Rizzi CF, Mauriz JL, Freitas Corrêa DS, Moreira AJ, Zettler CG, Filippin LI, Marroni NP, González-Gallego J.Effecten van lasertherapie op laag niveau (LLLT) op de nucleaire factor (NF) -kappaB-signaleringsroute bij getraumatiseerd spier. Laser Surg Med 2006; 38: 704-713.

15 Bo GP, Zhou LN, He WF, Luo GX, Jia XF, Gan CJ, Chen GX, Fang YF, Larsen PM, Wu J.Analyses van differentieel proteoom van menselijke synoviale fibroblasten verkregen uit artritis. Clin Rheumatol 2009; 28: 191-199.

16 Bálint G, Barabás K, Zeitler Zs, Bakos J, Kékesi KA, Pethes Á, Nagy E, Lakatos T, Tanos E, Bálint P, Szekanecz Z. Ex Vivo Soft-laserbehandeling remt de synoviale expressie van vimentine en a-enolase , Potentiële auto-antigenen bij reumatoïde artritis. Phys Ther 2011; 91: 665-674.

17 Garcia BA, Platt MD, geboren TL, Shabanowitz J, Marcus NA, Hunt DF. Eiwitprofiel van osteoartritisch menselijk gewrichtskraakbeen met behulp van tandem massaspectrometrie. Rapid Commun Mass Spectrom 2006; 20: 2999-3006.

18 Kirsch T, Swoboda B, Nah HD. Activering van expressie van annexine II en V, terminale differentiatie, mineralisatie en apoptose in menselijk osteoartritisch kraakbeen. Osteoartritis Cartilage 2000; 8: 294-302.

19 Fink AL. Chaperonne-gemedieerde eiwitvouwing. Physiol Rev 1999; 79: 425-449.

20 Hartl FU, Hayer-Hartl M. Moleculaire chaperonnes in het cytosol van de ontluikende keten tot gevouwen eiwit. Science 2002; 295: 1852-1858.

21 Lindquist S, Craig EA. De heat-shock-eiwitten. Annu Rev Genet 1988; 22: 631-677.

22 Tsan MF, Gao B. Cytokine-functie van heat shock-eiwitten. Am J Physiol 2004; 286: C739-C744.

23 Yokota S, Hirata D, Minota S, Higashiyama T, Kurimoto M, Yanagi H, Yura T, Kubota H.Auto-antilichamen tegen chaperonine CCT in menselijke sera met reumatische auto-immuunziekten vergeleken met antilichamen tegen andere Hsp60-familie-eiwitten. Cell Stress Chaperones 2000; 5: 337-346.

24 Sedlackova L, Sosna A, Vavrincova P, Frýdl J, Guerriero V, Raynes DA, Hromadnikova I. Het genexpressieprofiel van het warmteschokproteïne kan een onderscheid maken tussen reumatoïde artritis, artrose en gezonde controles. Scand J Rheumatol 2011; 40: 354-357.

25 Yamamoto S, Shimizu K, Shimizu K, Suzuki K, Nakagawa Y, Yamamuro T. Calciumafhankelijke cysteïneproteïnase (calpaïne) in menselijke artritis synoviale gewrichten. Arthritis Rheum 1992; 35: 1309-1317.

26 Suzuki K, Shimizu K, Hamamoto T, Nakagawa Y, Hamakubo T, Yamamuro T. Biochemische demonstratie van calpains en calpastatine in osteoartritisch synoviaal fluïdum. Arthritis Rheum 1990; 33: 728-732.

27 Whiteman M, Armstrong JS, Cheung NS, Siau JL, Rose P, Schantz JT, Jones DP, Halliwell B. Peroxynitriet bemiddelt calciumafhankelijke mitochondriale disfunctie en celdood door activering van calpains. Faseb J 2004; 18: 1395-1397.

28 Squier MK, Miller AC, Malkinson AM, Cohen JJ. Calpain-activering bij apoptose. J Cell Physiol 1994; 159: 229-237.

29 Szomor Z, Shimizu K, Fujimori Y, Yamamoto S, Yamamuro T. Het uiterlijk van calpaïne correleert met artritis en kraakbeenvernietiging in door collageen geïnduceerde artritische kniegewrichten van muizen. Ann Rheum Dis 1995; 54: 477-483.

30 Nakagawa Y, Shimizu K, Hamamoto T, Suzuki K, Ueda M, Yamamuro T. Calciumafhankelijk proteïnase (calpaïne) bij fractuurgenezing bij ratten. J Orthop Res 1994; 12: 58-69.

31 Fukui I, Tanaka K, Murachi T Extracellulaire verschijning van calpaïne en calpastatine in de synoviale vloeistof van het kniegewricht Biochem Biophys Res Commun 1989; 162559-66

32 Solau-Gervais E, Zerimech F, Lemaire R, Fontaine C, Huet G, Flipo RM Cysteïne- en serineproteasen van synoviaal weefsel bij reumatoïde artritis en osteoartritis. Scand J Rheumatol 2007; 36 (5) 373-7

33 Struglics A, Hansson M Calpain is betrokken bij de C-terminale afknotting van menselijk aggrecan. Biochem J 2010430531-8

34 Iguchi-Hashimoto M, Usui T, Yoshifuji H, Shimizu M, Kobayashi S, Ito Y, Murakami K, Shiomi A, Yukawa N, Kawabata D, Nojima T, Ohmura K, Fujii T, Mimori T.Overexpressie van een domein van calpastatine onderdrukt IL-6-productie en Th15-ontwikkeling via verminderde NF-KB en verhoogde STAT5-signalen. PloS One 2011; 6: e27020.

35 Ramos-Ruiz R, Avila J, López-Bote JP, Bernabeu C, Larraga V. Verminderde tubuline-synthese in synoviocyten van door adjuvans geïnduceerde artritisratten. Biochim Biophys Acta 1992; 1138: 184-190.

36 Campbell JJ, Blain EJ, Chowdhury TT, Knight MM. Het laden verandert de actinedynamiek en reguleert de cofiline-genexpressie in chondrocyten. Biochem Biophys Res Commun 2007; 361: 329-334.

37 Rollín R, Tornero P, Marco F, Camafeita E, Calvo E, López-Durán L, Jover JÁ, López JA, Lamas JR, Fernández-Gutiérrez B.Differentiaal proteoom van articulaire chondrocyten van patiënten met artrose. J Proteomics Bioinform 2008; 1: 267-280.

38 Blain EJ. Betrokkenheid van de cytoskeletelementen bij de homeostase en pathologie van gewrichtskraakbeen. Int J Exp Pathol 2009; 90: 1-15.

39 Haudenschild DR, Chen J, Pang N, Steklov N, Grogan SP, Lotz MK, D'Lima DD. Vimentin draagt ​​bij aan veranderingen in de stijfheid van chondrocyten bij artrose. J Orhop Res 2011, 29: 20-25.

40 Lambrecht S, Verbruggen G, Verdonk PC, Elewaut D, Deforce D. Differentiële proteoomanalyse van normale en osteoartritische chondrocyten onthult verstoring van het vimentinenetwerk bij artrose. Artrose Kraakbeen 2008; 16: 163-173.

41 Tilleman K, Deforce D, Elewaut D. Reumatologie een nauwe ontmoeting met proteomics. Rheumatology 2005; 44: 1217-1226.

42 Wang N, Stamenovic D. Bijdrage van tussenliggende filamenten aan celstijfheid, verstijving en groei. Am J Physiol Cell Physiol 2000; 279: C188-194.

43 Ea HK, Monceau V, Camors E, Cohen-Solal M, Charlemagne D, Lioté F. Annexine 5 overexpressie verhoogde articulaire chondrocyten apoptose geïnduceerd door basische calciumfosfaatkristallen. Ann Rheum Dis 2008; 67: 1617-1625.

44 Hambach L, Neureiter D, Zeiler G, Kirchner T, Aigner T. Ernstige verstoring van de distributie en expressie van type VI collageenketens in osteoartritisch gewrichtskraakbeen. Arthritis and Rheumatism 1998; 6: 986-996.

45 Murray DH, Bush PG, Brenkel IJ, Hall AC. Abnormale morfologie van menselijke chondrocyten is gerelateerd aan verhoogde niveaus van cel-geassocieerd il-1ß en verstoring van pericellulair collageen type VI . J Orthop Res 2010; 28: 1507-1510.

23 keer bekeken0 reacties
Uitleg behandeling Safe Laser.jpg

Een gratis adviesgesprek

voor uw pijn?

GA DIRECT NAAR

Of blijf op de hoogte via onderstaande kanalen

  • Facebook Social Icon
  • LinkedIn Social Icon

Pijncentrum Echt

Gelrestraat 19, 6101 EV Echt (Ingang Shoefit)

+316 27 53 6008

info@pijncentrumecht.nl